Сенная палочка: препараты, особенности и сфера применения
Содержание:
- Pathology
- Биологическое значение
- Статья составлена с использованием следующих материалов:
- Опасны или нет?
- Bacillus subtilis — стойкий боец
- Место обитания
- Действие на вредные организмы
- Выращивание бацилл
- Размножение и спорообразование
- Вакцинация растений
- Токсикологические свойства и характеристики
- Genome structure
- Спорообразующие бактерии рода Bacillus
- Препараты, в составе которых есть сенная палочка, и их преимущества
- Зимует ли гацания в открытом грунте?
- Статья составлена с использованием следующих материалов:
- Оценка альгицидной активности бактерий и их метаболитов
Pathology
Bacillus subtilis bacteria are non-pathogenic. They can contaminate food, however, they seldom result in food poisoning. They are used on plants as a fungicide. They are also used on agricultural seeds, such as vegetable and soybean seeds, as a fungicide. The bacteria, colonized on root systems, compete with disease causing fungal organisms. Bacillus subtilis use as a fungicide fortunately does not affect humans (EMBL EBI). Some strains of Bacillus subtilis cause rots in potatoes. It grows in food that is non-acidic, and can cause ropiness in bread that is spoiled (Todar). Some strains related to Bacillus subtilis are capable of producing toxins for insects. Those strains can also be used for protecting crops as well. Bacillus thuringiensis, for example, is another bacterium in the same genus that is used for insect control (EMBL EBI).
Some Bacillus species can cause food poisoning, such as Bacillus cereus and Bacillus licheniformis. Bacillus cereus can result in two different kinds of intoxications. It can either cause nausea, vomiting, and abdominal cramps for 1-6 hours, or diarrhea and abdominal cramps for 8-16 hours. The food poisoning usually occurs from eating rice that is contaminated with Bacillus cereus (EMBL EBI).
Some Bacillus organisms can cause more severe illnesses. Bacillus anthracis, for example, causes Anthrax. It was the first bacterial organism that was known to cause disease in humans. Bacillus anthracis spores can survive for very long periods of time. Anthrax is very rare in humans, however it is more common in animals. The disease often begins with a very high fever and chest pain, and can be fatal if untreated (EMBL EBI).
Биологическое значение
Биологическим сырьем для жизнедеятельности, или, образно говоря, пищей для микробов, служат белковые соединения и полисахариды (гликоген и крахмал). Для расщепления белков палочка вырабатывает ферменты-протеазы, а для расщепления полисахаридов – ферменты-амилазы.
Попадая в кишечник животных вместе с растительной пищей, бактерии расщепляют пищевые ингредиенты. Но этим их биологическая роль не ограничивается. Дело в том, что сенная бацилла подавляет рост патогенных (болезнетворных) микроорганизмов, и тем самым предотвращает развитие кишечных инфекций. В растениях сенная палочка тоже играет позитивную роль. Бактерия защищает здоровые растительные ткани от губительного действия плесневых грибков и других микроорганизмов.
Это одна из причин, почему некоторые животные, например, кошки и собаки, не являясь травоядными, периодически употребляют в пищу травянистые растения. Так они не только насыщаются растительной клетчаткой и витаминами, но и оздоравливаются с помощью сенной палочки.
А еще эта бацилла является низшим звеном пищевой цепочки. Ее поглощает представитель простейших, инфузория-туфелька. В свою очередь, инфузория идет в пищу моллюскам. Моллюски – это корм для рыбы, а рыба – еда для человека.
Статья составлена с использованием следующих материалов:
Березина Н.В. Биологические препараты «Алирин-Б» и «Гамаир» в борьбе с фитофторозом томата и картофеля. Биологические препараты. Сельское хозяйство. Экология / ООО «ЭМ-Кооперация». — Москва, 2008. — С. 246-248
2.
Березина Н.В.; Костенко Т.А. Механизмы действия микробиологических препаратов «Алирин-Б» и «Гамаир» . Биологические препараты. Сельское хозяйство. Экология / ООО «ЭМ-Кооперация». — Москва, 2008. — с. 248-250
3.
Биологическая защита растений/М. В. Штерншис, Ф. С.-У. Джалилов, И. В. Андреева, О. Г. Томилова; Под ред. М. В. Штерншис. — М.: КолосС, 2004. — л. ил.: ил. — 264 с. — (Учебники и учеб. пособия для студентов высш. учеб. заведений);
4.
Государственный каталог пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории Российской Федерации, 2013 год. Министерство сельского хозяйства Российской Федерации (Минсельхоз России)
5.
Гришечкина Л.Д., Долженко В.И. и др. Бактериальные препараты в борьбе с болезнями сельско-хозяйственных культур. Материалы международной научно-практической конференции «Современные средства, методы и технологии защиты растений»/ сибирский научно-исследовательский институт земледелия и химизации сельского хозяйства. – Новосибирск, 2008. — с. 48-52
6.
Иванова Г.П., Красавина Л.П. Влияние бактофита на комплекс энтомофагов, применяемых в защищенном грунте. Материалы VIсовещания «Вид и его продуктивность в ареале», Санкт-Петербург, 23-26 ноября 1993 г. Санкт-Петербург, Гидрометеоиздат, 1993. с.237-238
7.
Коробова Л.Н., Холдобина Т.В. и др. Влияние гербицидов и биологических антидепрессантов к ним на микрофлору и фитотоксичность почвы в последействии
8.
Краткий словарь-справочник по биологической защите растений, Российская академия сельско-хозяйственных наук . Санкт-Петербург, 2005, — 99 с.
9.
Помелов А.В, Влияние биопрепаратов Альбит и Алирин-Б на корневые гнили и урожайность ячменя. Материалы всероссийской научно-практической конференции «Инновационное развитие АПК. Итоги и перспективы» 06.02.-09.02.2007 г. Т.1/ Ижевская государственная сельскохозяйственная академия. – Ижевск, 2007. – с.26-29
10.
Рудаков В., Морозов Д. Защитим урожай фитопрепаратами. Журнал «Главный агроном», 11, 2008 г., с.27-29
11.
Сахибгареев А.А.; Лукьянов С.А.; Мухутдинов Ф.Г.; Кудоярова Р.А. Фитоспорин-М — модифицированный промышленный микробиологический фунгицид комплексного действия . Эффективность гербицидов и фунгицидов при совместном применении с антистрессовыми регуляторами роста на зерн.культурах. – Уфа: Гилем, 2003. — с. 65-70
12.
Хаитов Р.М. Аллергология и иммунология. Национальное руководство. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 636 с.
Изображения (переработаны):
13.
B0008259 Confocal micrograph of Bacillus subtilis, by Wellcome Images, по лицензии CC BY-NC-ND
14.
Bacillus subtilis, Bacillus subtilis, Maciej Górny, by Davehwng, по лицензии CC BY-NC-SA
15.
DSC00013, by Oliver Tan Mejia, по лицензии CC BY-ND
Свернуть
Список всех источников
Опасны или нет?
Относительно патогенности Бациллюса существует несколько мнений. Так, в соответствии с официально действующими на территории Российской Федерации санитарными правилами и нормами, Bacillus subtilis принадлежит к роду условно-патогенных бактерий.
Jpg» alt=»Девушка смотрит в микроскоп» width=»300″ height=»188″ srcset=»» data-srcset=»https://probakterii.ru/wp-content/uploads/2015/07/Vyjavlenie-bakterij-300×188..jpg 640w» sizes=»(max-width: 300px) 100vw, 300px»> Однако Большая Советская Энциклопедия, а также авторитетные зарубежные источники твердо настаивают на безопасности Бациллюса субтилис, утверждая, что данный микроорганизм является абсолютно не патогенным. В результате научных исследований была доказана безопасность данных бактерий из рода бацилл как для людей, так и для животных. Таким образом, Управление по контролю качества лекарственных и продовольственных средств в Соединенных Штатах Америки справедливо присвоило Bacillus subtilis статус абсолютно безопасных организмов.
Однако, несмотря на данный факт, ни в коем случае не допускается присутствие Сенной палочки в разнообразных консервах, в частности, рыбных, мясных и растительных.
Всегда следует иметь в виду, что если по каким-либо причинам в консервах остались споры, сохранившие свою жизнеспособность, это значит, что при хранении данного продукта при температуре, превышающей +20 ºC, размножение возбудителей будет неизбежным. Поэтому, для того чтобы обезопасить консервы от содержания Бациллюса, необходимо тщательно соблюдать все технологии и нормативы приготовления продуктов данного типа. Как правило, о присутствии Bacillus subtilis в консервах сигнализирует наличие характерного сероватого налета. Кроме того, с запахом и консистенцией консервов происходят определенные неблагоприятные изменения.
Bacillus subtilis — стойкий боец
Добиться стойкого перемирия в кишечнике сложно, и кормить собаку пищей, обогащённой пробиотиками, становится насущной необходимостью. По мнению ветеринарных врачей, наилучшим рационом для собаки является качественный сухой корм. Только вот большинство пробиотиков не могут пережить процесс его приготовления: слишком они чувствительны к температурным воздействиям.
Однако на наше счастье в неподдающейся исчислению армии бактерий есть и стойкие бойцы. Разрешите представить — Bacillus subtilis. Её полное имя звучит торжественно: грамположительная спорообразующая аэробная бактерия, а по-простому — сенная палочка. Сенная — потому, что раньше Bacillus subtilis получали исключительно из сенных отваров, а палочка — потому, что именно так бактерия выглядит под микроскопом.
Сенная палочка Bacillus subtilis широко распространена в природе, в присутствии кислорода она образует споры, что позволяет ей сохраняться во внешней среде в течение длительного периода. Бактерия живёт в почве, выживая, что называется, при любой погоде. Именно в невероятной устойчивости и заключается одна из главных особенностей сенной палочки.
Она не гибнет под воздействием антибиотиков, химических препаратов, высоких температур, вплоть до кипячения, не страшно ей и замораживание. Не разрушаясь, Bacillus subtilis проходит через кислую среду желудка в тонкий кишечник, где продолжает сохранять устойчивость к флавомицину, канамицину, антибиотикам тетрациклинового ряда, пенициллину и другим агрессивным к микроорганизмам веществам.
Место обитания
Этот вид обычно находятся в верхних слоях почвы, а также доказательства того , что Б. Сенной является нормальным кишечным синантропным в организме человека. Исследование 2009 по сравнению с плотностью спор , обнаруженных в почве (около 10 6 спор на грамм) в том , что найдены в фекалиях человека (около 10 4 спор на грамм). Число спор , обнаруженных в кишечнике человека было слишком высоко , чтобы отнести исключительно к потреблению через загрязнение пищевых продуктов. B. Сенная был связан расти в возвышенностях и действовать в качестве идентификатора как эко-адаптивности и здоровья медоносной пчелы.
Действие на вредные организмы
Механизм действия. Биологическая активность препарата обуславливается как антагонизмом самой культуры, так и антибиотиком, синтезируемым в процессе роста и относящимся к группе аминогликозидов.
После применения препарата на розах в условиях защищенного грунта наблюдался ростостимулирующий эффект, который, видимо, проявлялся не только за счет уменьшения пестицидного пресса, но и за счет компонентов, входящих в состав самого препарата: бактерий и спор (занимают свободные экологические ниши), активных метаболитов, гуматов и микроэлементов. За время применения уменьшилось также количество пораженных серой гнилью (возбудитель Botrytis cinerea) стеблей роз.
В сухую и жаркую погоду эффективность препарата снижается.
Наибольший эффект может быть получен при применении препарата для обработки сначала семян, а затем растений во время вегетации опрыскиванием.
Выращивание бацилл
Для эффективного выращивания бактерии Bacillus subtilis могут требоваться среды нескольких видов:
- жидкая среда, а именно мясопептонный бульон;
- плотная среда – мясопептонный агар;
- простые питательные среды, полученные синтетическим путем;
- среды с содержанием остатков растительного происхождения.
Под понятием мясопептонного агара принято подразумевать универсальную питательную среду, которая может иметь как плотную, так и полужидкую текстуру. В составе данной среды присутствуют такие компоненты, как мясная вода, поваренная соль, а также размельченный и тщательно промытый агар. Для его стерилизации в автоклаве необходима температура не менее 120 ºC, а процесс этот должен длиться приблизительно двадцать-тридцать минут. После завершения стерилизации готовая среда будет остывать естественным путем, приобретая более плотную текстуру.
Максимально благоприятное развитие Сенной палочки гарантируется при уровне температуры воздуха от +5 до +45 ºC.
Размножение и спорообразование
Сенная палочка, как и остальные бактерии, размножается простым продольным делением клетки пополам. Новые бактерии, образовавшиеся после такого деления, нередко остаются соединенными между собой тонкой нитью. Такие нити легко различимы на фото.
Спорообразование бактерии начинается с того, что содержимое клетки (протопласт) приобретает зернистую структуру. Одно из зернышек, чаще всего в центре клетки, начинает расти и покрывается твердой оболочкой. Одновременно происходит постепенное разрушение внешней оболочки материнской клетки. Процесс завершается выпадением споры во внешнюю среду.
Каждая из клеток, соединенных нитями после вегетативного деления, сохраняет способность к образованию спор.
Судя по фото, сделанным под микроскопом, большинство спор имеют круглую или овальную форму. Они устойчивы к неблагоприятным внешним факторам, в частности, к повышенной температуре – выдерживают перегрев свыше 100°С.
Клетки, развившиеся из спор, и первые их потомки неподвижны. Способность перемещаться появляется только у следующих поколений.
Вакцинация растений
В начале статьи говорилось о вакцинации растений. Она дает защиту лишь от некоторых вирусных (но не грибных и бактериальных) заболеваний, поэтому пока встречается редко. Суть ее заключается в обработке растений в молодом возрасте ослабленными слабовирулентными штаммами вирусных болезней. Обработка эта заключается в опрыскивании мелкодисперсионными аэрзолями вакцины из пульверизатора или любого опрыскивателя. Вопрос только в том, где взять вакцину, если отечественные биолаборатории ее практически не производят.
Подводя итог, надо честно сказать, что эффективных биофунгицидов против ряда болезней, увы, нет. Например, остановить пероноспороз огурца, фитофтору томатов и картофеля, пыльную и пузырчатую головню кукурузы, рак картофеля и т. д. одними биофунгицидами сложно. По этой причине эти культуры относятся к наиболее сложным для выращивания их органической продукции. И если против вредителей в этом случае есть запасной вариант — энтомофаги, то в случае с болезнями приходится прибегать к комплексной защите всеми вышеперечисленными методами, что впрочем, не дает 100% результата.
Авторы: С. Ибрагимова, Л. Беневьят
Токсикологические свойства и характеристики
Опасность для человека. Как и многие другие микроорганизмы, Bacillus subtilis способны выступать в виде аллергенов; реакция на эту бактерию носит название аллергия на сенную палочку. Обычно она проявляется только в виде кожных симптомов, но может протекать и в более тяжелых формах. Наблюдается нечасто.
Классы опасности. Препараты на основе Bacillus subtilis относятся к 3, 3В или 4 классам опасности для человека и 3 классу опасности для пчел.
Полезные виды. Бактофит обладает токсическим действием на афидофагов, остальные средства безопасны или практически безопасны для полезных видов.
Теплокровные. Малотоксичны для теплокровных животных.
Genome structure
Only one DNA molecule is present in these cells. Bacillus subtilis has one circular chromosome. The total size of all the DNA is 4,214,814 bp (4.2 Mbp) (TIGR CMR). 4,100 genes code for proteins. 53% of the protein-coding genes are only seen once, while 25% of the genome relates to families of genes that have undergone gene duplication (Kunst 1997).
A great portion of the genome corresponds to carbon source applications (Kunst 1997). 192 of the 4,100 genes are considered indispensable, and an additional 79 are thought to be essential. Most of the essential genes are involved in metabolism. Half of the essential genes are responsible for processing information, one-fifth of them are responsible for cell wall synthesis, cell division and shape, and one-tenth of them were responsible for the energetics of the cell. The essential genes that code for functions that are not known are 4% (Kobayashi 2003). Bacillus subtilis bacteria are capable of secreting antibiotics in great numbers to the exterior of the cell (Ara 2007). Five signal peptidase genes were found to be important for this secretion function. Many of Bacillus subtilis cells’ genes are responsible for antibiotic synthesis (Kunst 1997).
Спорообразующие бактерии рода Bacillus
Обращали ли вы внимание как животные ищут себе травку? На самом деле они ищут именно эти бактерии, расположенные на растениях, так как они предотвращают болезни. В 18 веке это исследовали ученые и открыли так называемую «Сенную палочку»
На латыни она называется Bacillus subtilis. Получают эту полезную бактерию с сенной экстракта, ее производят пептидные антибиотики и ферменты. Научно доказано абсолютную безвредность Bacillus subtilis для человека. На основании отсутствия вредности штаммов Bacillus subtilis присвоено Управлением по контролю качества продовольственных и лекарственных средств США статуса GRAS (статус безопасного организма).
Уникальный механизм действия бактерии B.subtilis связано с уникальной способностью самостоятельно производить антибиотикоподобные вещества и ферменты, усиливать защитные силы организма в борьбе с обычными и специфическими возбудителями, стимулировать нормальный рост микрофлоры кишечника. Произведенные B.subtilis вещества активно подавляют рост и развитие вредных бактерий, вирусов и грибов, не вызывая привыкания. Иммуномодулирующее действие связано с активацией макрофагов, усилением барьерной функции кишечника, активацией Т и В лимфоцитов. Уничтожая вредные микроорганизмы, освобождают место для расселения лакто- и бифидобактерий, которые являются типичными представителями нормальной микрофлоры.

Препараты, в составе которых есть сенная палочка, и их преимущества
Сенная палочка имеет много штаммов (штамм – культура генетически однородных микроорганизмов, полученных в лабораторных условиях). При этом каждый штамм обладает особыми свойствами, которые ученые используют для разработки микробиологических препаратов в виде порошка, суспензии, пасты или таблеток. Перечислим наиболее известные из них.
| Препарат | Форма выпуска | Вид штамма Bacillus subtilis и добавки |
| Алирин-Б | порошок, таблетки | штамм ВИЗР-10 |
| Бактофит | порошок, суспензия | штамм ИПМ 215 |
| Гамаир | порошок, таблетки | штамм М-22 ВИЗР |
| ФитоДоктор | порошок, суспензия | штамм LZ12 с живыми клетками и продуктами их метаболизм |
| Фитоспорин-М | порошок, паста, суспензия | штамм 26 Д с гуминовыми кислотами |
Важный «плюс» биофунгицидов на основе сенной палочки заключается в том, что это не опасная «химия», следовательно, обработка ими не представляет особой угрозы для здоровья человека. Среди прочих достоинств отметим следующие:
- высокие фунгицидные свойства, подавляющие жизнедеятельность возбудителей грибковых и бактериальных заболеваний (особенно на ранних стадиях, а также при проведении профилактических мероприятий);
- стимуляция роста, благодаря чему сокращается время прорастания семян и появления всходов;
- обеззараживание семян и луковиц от патогенов и условных патогенов;
- возможность обрабатывать культуры в целях их защиты на протяжении всего периода вегетации, в то время как пестициды и другая «химия» имеют строгие ограничения по срокам использования;
- увеличение урожайности садово-огородных культур на 20-30%;
- возможность снизить себестоимость сельскохозяйственной продукции за счет исключения применения дорогостоящих химических препаратов;
- отсутствие срока ожидания: плоды можно срывать и употреблять в пищу сразу после обработки.
При всех достоинствах стоит отметить и существенный недостаток бактерии сенной палочки. В отличие от химических фунгицидов, она имеет непродолжительный срок действия и быстро теряет свои свойства на воздухе. Поэтому применять растворы на ее основе нужно несколько раз за сезон.
Зимует ли гацания в открытом грунте?
Статья составлена с использованием следующих материалов:
Биологическая защита растений/М. В. Штерншис, Ф. С.-У. Джалилов, И. В. Андреева, О. Г. Томилова; Под ред. М. В. Штерншис. — М.: КолосС, 2004. — л. ил.: ил. — 264 с. — (Учебники и учеб. пособия для студентов высш. учеб. заведений);
2.
Бушковская Л.М., Марчук Т.Л. и др. Эффективность бактофита на лекарственных культурах. Тезисы докладов Всероссийского съезда по защите растений «Защита растений в условиях реформирования агропромышленного комплекса: экономика, эффективность, экологичность», Санкт-Петербург, декабрь 1995 г., с.293-294
3.
Государственный каталог пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории Российской Федерации, 2013 год. Министерство сельского хозяйства Российской Федерации (Минсельхоз России)
4.
Иванова Г.П., Красавина Л.П. Влияние бактофита на комплекс энтомофагов, применяемых в защищенном грунте. Материалы VIсовещания «Вид и его продуктивность в ареале», Санкт-Петербург, 23-26 ноября 1993 г. Санкт-Петербург, Гидрометеоиздат, 1993. с.237-238
5.
Коробова Л.Н., Холдобина Т.В. и др. Влияние гербицидов и биологических антидепрессантов к ним на микрофлору и фитотоксичность почвы в последействии
6.
Полубояринов П.А. Опыт применения биопрепарата бактофит в условиях защищенного грунта на культуре роз. Журнал «Гавриш», №3, 2010. с.38-40
Свернуть
Список всех источников
Оценка альгицидной активности бактерий и их метаболитов
Объектами исследования служили следующие виды сельскохозяйственных растений: яровая мягкая пшеница (Triticum aestivum L.) сортов Омская 35 и Казахстанская 10, озимая пшеница сорта Волжская качественная; озимая рожь (Secаle cereаle L.) сорта Чулпан-7, ячмень (Hordeum vulgare L.) сорта Прерия, подсолнечник (Helianthus annuus L.) сорта Енисей, кукуруза (Zea mays L.) сорта РИК-340, горох (Pisum sativum L.) сорта Чишминский 95, овес (Avena sativa L.) сорта Победа, горчица белая (Sinapis alba L.) сорта Рапсодия. В работе исследовались также растения костреца безостого (Brоmopsis inеrmis L.).
В качестве тест-объектов служили чистые культуры водорослей Scenedesmus quadricauda (Turpin) Brеbisson, Chlorella vulgaris Beyer, предоставленные Стерлитамакским подразделением Государственного учреждения Управления государственного аналитического контроля Министерства экологии и природных ресурсов Республики Башкортостан.
В экспериментах использовали два штамма Bacillus subtilis Cohn.: 26Д (коллекция ВНИИСХМ С.-Пб.-Пушкин, №128), 11ВМ (ВНИИСХМ №519). Первый штамм выделен из поверхностно стерилизованных тканей растений хлопчатника (Недорезков, 2003), второй – мягкой яровой пшеницы (Егоршина и др., 2011). Штамм бактерий A. vinelndii ИБ-1 был любезно предоставлены д.б.н., проф. Логиновым О.Н. (УИБ РАН, г. Уфа), за что автор выражает ему глубокую благодарность. subtilis использовались следующие питательные среды (состав г/л): 1) Мясо-пептонный бульон (МПБ): мясная вода (отвар 0,5 кг мяса в 1 л воды), пептон («Panreac», Испания) – 10, NaCl – 5, агар микробиологический («Panreac», Испания) — 15. 2) Мясо-пептонный агар (МПА): МПБ с добавлением агара 20. 3) Картофельно-глюкозный агар (КГА): картофельный отвар (0,2 кг картофеля в литре воды), глюкоза («Экрос», Россия) — 20, агар-агар — 15. Устойчивость бактерий к ТМ оценивали по их росту на МПА в чашках Петри при 37С в течение 24-48 ч, обогащенном солями: Cd(N03)2-4H2Oj Pb(N03)2, МС13-4Н20, (эти и указанные далее соли поставлены компанией «Экрос», Россия).
Для определения биоиммобилизации металлов бактерии выращивали в среде с пониженным В работе для хранения, размножения и поддержания культур эндофитных штаммов B. образованием комплексных соединений с ТМ, г/л (Белимов и др., 2004): глюкоза — 1, сахароза — 1, пептон — 1, дрожжевой экстракт («Экрос», Россия) — 1, NKtNCb — 0,5, MgS04-7H20 — 0,2, NaCl — 0,1, СаС12 — 0,02, FeCl3 — 0,01, рН 6,8-7. Бактерии культивировали при температуре 37оС, используя шейкер лабораторный ПЭ-6410 («Экрос», Россия) при скорости вращения 180 об/мин Через 18 ч культуру центрифугировали 20 мин при 8000 об/мин (СМ-50, «Elmi», Латвия). В надосадочной жидкости и осадке клеток определяли содержание кадмия. Для этого осадок промывали центрифугированием в дистиллированной воде (1:15, мл:мл) и оценивали содержание ТМ как описано далее. Коэффициент распределения кадмия между биомассой бактерий и питательной средой рассчитывали как соотношение концентраций в сухой биомассе и супернатанте (мкг Cd/мг) (Белимов, 2004).
В экспериментах с водорослями суспензии клеток В. subtilis получали выращиванием на шейкере в жидкой полусинтетической среде (Недорезков, 2003). Вначале в асептических условиях замеряли объем культуры. Клетки бактерий собирали центрифугированием (5 мин при 12000 об/мин). Клетки промывали еще раз 0,05%-ным раствором КС1, центрифугируя их, как описано выше. Супернатанты объединяли для экспериментов. Отмытые клетки суспендировали в растворе КС1 объемом, равном первоначальному объему культуры. Инактивирование клеток бацилл вместе с культуральной жидкостью проводили в автоклаве при температуре 120оС и давлении 1,1 атм. в течение 60 мин.
Азотфиксирующие бактерии выращивали 48 ч при 24-26С в чашках Петри на среде, содержащей (г/л): сахароза – 10; KH2PO4 – 1,0; MgSO47H2O – 0,2; ацетат NaСН3СОО – 0,2; цитрат кальция – 0,2; NaCl – 0,1; FeSO47H2O – 0,01; Na2MoO42H2O – 0,001; агар микробиологический – 20, рН 7,5 (Практикум по микробиологии, 2005). Водоросли выращивали на светоплощадке в колбах объемом 1 л на жидкой минеральной среде Прата (Жмур, Орлова, 2007) при температуре 25оС и освещенности 3000 лк.







